这一季的故事发生在上一季的3年后。这一季里，托尼（卡洛斯·博纳德CarlosBernard饰）和米歇尔（蕾可·艾尔丝沃斯ReikoAylesworth饰）结婚了，并且成为了CTU的主管，而杰克（基弗·萨瑟兰KieferSutherland饰）的女儿金姆也加入CTU成为了一名情报分析员。剧情由一具被扔在洛杉矶卫生中心外并感染了致命病毒的尸体开始。一个墨西哥毒枭为了让美国政府释放自己的哥哥，以致命病毒为恐吓。杰克也因此又踏上了反恐调查之路。而这一季里面，杰克的调查并不顺利，为了打入毒贩内部，杰克不惜染上毒瘾，这导致他在调查中困难重重。而白宫方面，获得连任的鲍尔默总统（丹尼斯·海斯伯特DennisHaysbert饰）康复后身边多出了一位私人医生女友，而总统的弟弟韦恩成为了他的得力助手，在连任压力面前，又要化解这场生化危机。总统还能像前几次那样给予杰克强有力的支持吗？
凯拉·伍兹（Elisha Cuthbert饰）的女儿神秘地消失在他们乡下新房子的地窖里，然而凯拉很快发现，有一个古老而强大的恶魔控制着他们的家，她将不得不面对或冒着永远失去家人灵魂的风险。与卡斯伯特一起最后与宇宙中最古老的邪恶作斗争，否则将永远失去家人的灵魂。
几个好友结伴前往观看美国大学美式足球冠军赛，他们在前往比赛地时决定顺便在野外进行一次野营。于是，卡莉（伊丽莎•库斯伯特 Elisha Cuthbert 饰）、佩兹（帕丽斯•希尔顿 Paris Hilton 饰）等几个年轻人在了野外一处荒地扎了营。他们的恐怖经历就此展开。
这一次，袭击将在纽约展开。经过第七季的努力，杰克（基弗·萨瑟兰KieferSutherland饰）终于获得了总统的赦免，现在一身轻松的与女儿和孙女过着简单、轻松的幸福生活。可是这样的生活却没有持续多久，一名雇佣兵找上门来，希望杰克能回到重新组建的CTU，帮忙调查一场即将展开的恐怖阴谋。原来，一个中东国家的总统打算和泰勒总统签署一项联合声明，但是中东国家的反对派却极力想组织这次联合声明的签署，所以想刺杀这位总统。杰克不得不接受了这次任务，同时克洛伊（玛丽·莱恩·莱杰斯库MaryLynnRajskub饰）也被临时召集回来帮助杰克进行数据分析，但是已经身为人母，所以克洛伊无法集中精力全心帮助杰克，而杰克还要带着没有什么处理恐怖袭击经验的新人一同调查。面对全新的CTU，已经陌生的环境下，杰克还能顺利阻止袭击吗？
上午8点，美国情报部门收到消息，今天会有一颗核弹在美国境内爆炸。为了阻止这场恐怖袭击，CTU再次召回了因失去妻子已离开CTU一年之久的杰克·鲍尔（基弗·萨瑟兰KieferSutherland饰）。随着调查的不断深入，阴谋的轮廓越来越清晰。原来，为了能挑起战争，恐怖组织伪造了一份录音文件，想借美国的手向录音文件中提到的三个国家发动战争。虽然总统对杰克的调查非常相信，但是只有猜测而无实质证据的情况下，总统也无力阻止这场一触即发的战争。由于总统执意拖延阻止发动攻击，内阁和副总统通过通过宪法暂时剥夺了总统的权力，这下杰克没有了总统的支持，只能孤军奋战。时间一点点的流逝，仅有的时间里杰克能查明真相吗？
深夜12点，美国洛杉矶反恐小组负责人杰克·鲍尔（基弗·萨瑟兰KieferSutherland饰）接到同事妮娜·麦尔斯（莎拉·克拉克SarahClarke饰）的电话，让他火速回办公室，因为情报显示。首位黑人总统候选人——参议员大卫·派尔默（丹尼斯·海斯伯特DennisHaysbert饰）正受到暗杀威胁，而且CTU里面可能有内鬼。因此杰克需要在接下来的这24小时内，追踪杀手保护总统候选人，并查出内鬼。同时，杰克的女儿金姆（伊丽莎·库斯伯特ElishaCuthbert饰）偷跑出家与女友珍妮去参加派对，却不想被挟持。为了找到女儿，特瑞（伊丽莎·库斯伯特ElishaCuthbert饰）和珍妮的父亲只得独自去寻找女儿。可是，不想女儿被绑架原来是恐怖分子策划的，寻找女儿的妻子特瑞也一同被恐怖分子所绑架。为了拯救妻女的性命，杰克不得不听从首领格恩斯（迈克尔·马西MichaelMassee饰）的摆布。在接下来的时间里，杰克只得使尽浑身解数，在保证妻女安全的同时，还得保护总统候选人派尔默的安全……
讲述肖恩扮演的泰德，打算在自杀前，回到家乡弥补过失。
职业罪犯小吉尔伯特·加尔文(杜哈明饰)从美国监狱逃出并越过边境进入加拿大，在加拿大，他化名为罗伯特·怀特曼，有了新的身份。在坠入爱河并结婚后，他声称接受了一份旅行安全顾问的工作，但他大胆的犯罪行为仍在继续。在他向终身黑帮成员汤米(吉布森)寻求投资后，他的事业变得更加复杂，他卷入了加拿大历史上最大的抢劫案，这使他成为跨国追捕的核心人物。
除却在镁光灯前的光鲜之后，陪伴名模珍妮弗（伊丽莎·库斯伯特 Elisha Cuthbert 饰）的只有她的宠物狗。难得的一天休息，珍妮弗前往夜店喝酒却被人下迷药，醒来之后发现自己被杀人狂囚禁在一间密室之内。面对影子一般杀人狂的种种折磨和恐吓，珍妮弗几次试图逃走都没有成功 。就在她心灰意冷的时刻，她发现了与她一墙之隔的盖瑞（丹尼尔·吉里斯 Daniel Gillies 饰）。盖瑞告诉珍妮弗他也是被囚禁于此，两人因在绝望中寻找到同伴而产生一丝慰藉。杀人狂继续对二人施以各种折磨，在与杀人狂的周旋中盖瑞总是设法保护珍妮弗。珍妮弗慢慢对这个英勇的男人萌生好感，绝望的黑暗里两人用身体给予对方勇气和希望。然而，真相却在此时逐渐浮出水面……
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